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玫瑰的組織培養和快速繁殖

玫瑰屬薔薇科薔薇屬植物,不但具有一定的園林觀賞價值,而且有較高的經濟價值和藥用價值。玫瑰常規以分株、壓條、扡插等方法繁殖,繁殖率較低。現甘肅省慶陽縣有一玫瑰生產基地開展研究建立玫瑰的快速繁殖體系,並為玫瑰的工廠化生產和規模化種植提供科學依據。

    一、材料與研究方法

    1.材料:以甘肅省隴東學院校園內栽培的玫瑰為材料。

    2.研究方法:以MS或1/2MS為基本培養基,附加不同濃度的6-BA、IAA、IBA、NAA等,蔗糖3%(為了降低成本,蔗糖均用市售白砂糖代替),瓊脂0.35%,pH5.8,培養溫度為25℃,光照時間每天12小時,光照強度約1500 lx。將啟動培養基上腋芽長出的無根苗剪成單芽莖段,轉入不定芽誘導培養基上,誘導不定芽產生;不定芽繼代週期為5周,增殖培養時將不定芽塊切割成小芽塊轉至增殖培養基中,每100毫升培養瓶中接種3個芽塊;生根前將較弱的無效苗轉入壯苗培養基中促使苗健壯;生根培養時將高約3釐米左右的芽剪下插入生根培養基,生根苗移栽採用“二步法”。

    二、結果與分析

    1.無性系的建立。2005年6月從該院校園栽培的植株上取生長健壯的半木質化枝條,依常規方法滅菌處理後,剪成莖尖和帶腋芽莖段,接種於無性系建立培養基上。20天後統計實驗結果顯示,就無性系建立而言,基本培養基MS比1/2MS效果好,在基本培養基中附加每升0.5毫克的6-BA和每升0.05毫克NAA,有利於愈傷組織的誘導和芽的萌生,愈傷組織誘導率可達76.5%,萌芽率為52.9%,且芽生長健壯。

    2.不定芽的誘導。將無性系幼莖切成單芽莖段,分別接種在不定芽誘導培養基上,結果表明,以MS為基本培養基,附加每升1~3毫克的6-BA和每升0.1~0.5毫克的NAA,均可高頻誘導產生不定芽,當6-BA以較高濃度(每升2~3毫克)與NAA配合使用時,芽誘導率均為100%,產生的不定芽數量多,但莖不伸長,均為葉片,長勢弱;較低濃度6-BA(每升1毫克)與每升0.1毫克NAA配合使用,雖然不定芽誘導率下降,但芽長勢良好。說明MS附加較低濃度的6-BA與NAA利於玫瑰不定芽誘導與生長。同時發現,誘導產生的包埋於培養基中的不定芽長勢最好,可能與其充分吸收營養有關。

    3.芽的繼代增殖培養及有效苗的產生。將產生的不定芽塊切割成小芽叢進行繼代增殖培養,增殖培養基為 MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克,繼代週期為5周。在此培養基上,玫瑰仍以不定芽方式增殖,且大部分不定芽明顯增高,葉片展開,長勢較好。每100毫升培養瓶接種3個芽塊(約35個芽),經過一個繼代週期培養,芽總數達132個,增殖係數為3.77。其中,高度在3釐米左右,能用於生根的有效苗的比率為43%,將較矮、長勢弱的無效苗剪下,轉到1/2 MS壯苗培養基上,培養20天左右,芽苗明顯長高、健壯,葉片舒展,葉色濃綠,可用於生根。

    4.激素濃度對生根的影響。將增殖培養基上高度在3釐米左右的芽剪下,與壯苗後的芽一起插入生根培養基中誘導生根。結果顯示,玫瑰為難生根植物,不同培養基和激素濃度對玫瑰生根的影響差異較大。培養基中無機離子強度對玫瑰生根有明顯影響,無機離子減半(1/2MS)有利於生根。單獨附加每升0.2~0.5毫克的IAA、IBA或NAA對根的產生及根的生長均有促進作用。每升0.2~0.5毫克的IAA與每升0.2~0.5毫克IBA配合使用,生根率明顯提高,平均為38.6%,且切口端愈傷化程度低,產生的根短而粗壯,利於移栽;IAA、IBA、 NAA三者配合使用,生根效果最佳,生根率最高達76.3%,產生的根粗壯、數量多,便於移栽成活。篩選出最佳生根培養基為1/2MS+每升IAA0.5毫克+每升IBA0.5毫克+每升 NAA0.2毫克。

    5.煉苗與移栽。將生根的組培苗在室內打開瓶蓋煉苗2~3天後,在自來水中洗淨根部培養基,移入珍珠岩苗床,外搭塑膠拱棚及遮陽網,控制光照度在5000~10000 lx以內,溫度在15℃~35℃,濕度在85%以上,每週噴1次10%的MS大量元素營養液,2周後逐漸打開小拱棚,增加光照,4周後,便可進行常規管理。此法移栽,成活率可達94.3%。

    三、小結

    試驗結果表明,適合玫瑰不定芽誘導的培養基為 MS+6-BA每升1.0毫克+NAA每升0.1毫克;適合芽增殖的培養基為MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克,在此培養基上芽的增殖係數為3.77,可直接用於生根的有效苗的比率為43%;適合芽生根的培養基為1/2MS+IAA每升0.5毫克+IBA每升0.5毫克+NAA每升0.2毫克,在此培養基上芽的生根率為76.3%。生根苗煉苗後以珍珠岩作基質,移栽成活率為94.3%。據計算,當增殖係數為3.77、生根率為76.3%、移栽成活率為94.3%時,1個芽經1年10代培養,可產生約58萬個芽,考慮到生產設施及人力等因素的限制,如此多的芽不可能一次全部生根,導致無法處理,甚至倒苗。因此,在實際生產中,如果從第7代開始將高度在3釐米左右43%芽進行生根與移栽,則1年可由1個芽生產3349株商品苗;同樣,如果從第8代開始,1年1個芽可生產12,000餘株商品苗。這樣,對降低成本、提高效益是十分必要的。
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